1. Krevní stopy

1.4. Specifické metody

Ke specifickému průkazu krve se využívají zpravidla mikrokrystalografické a spek­troskopické metody. Principem těchto metod je průkaz hemoglobinu, případně jeho derivátů v rámci mikrokrystalografických zkoušek.

  • Bertrandova zkouška - hemoglobin tvoří s ledovou kyselinou octovou v přítomnosti chloridu hořečnatého při teplotě 120 °C krystalky acetchlorheminu. Jsou to hnědé až hnědočervené krystalky obdélníkového či kosočtverečného tvaru.  Metoda je rychlá, citlivá a specifická.

           Potřeby pro Bertrandovu zkoušku.     Charakteristický obdélnikový a kosočtverečný tvar krystalků acetchlorheminu.

  • Hemochromogenová zkouška dle Takayamy - použité činidlo (10% roztok glukózy 5 ml, 10% hydroxid sodný 10 ml, destilovaná voda 65 ml, pyridin 20 ml) vede po zahřátí vzorku za přítomnosti krve ke vzniku hemochromogenových krystalků, které mají růžovou až oranžově červenou barvu a jsou dosti pestrého vzhledu - od drobných pentliček až k obrazu sněhových vloček a tvarům, které připomínají námrazu na skle. Zkouška je rovněž specifická a dává dobré výsledky i se skvrnami starými, zahřátými, hnijícími nebo byla-li skvrna ve styku se zásadami či kyselinami.

          Charakteristický vzhled krystalků hemochromogenu tvaru pentliček až obrazu sněhových vloček či namrázy na skle.

  • Mikrospektroskopická zkouška - spočívá v průkazu spektra hemochromogenu vzniklého reakcí hemoglobinu s činidlem užívaným ve zkoušce dle Takayamy. Reakci provedeme na podložním skle a spektrum pozorujeme v mikrospektroskopu, který lze nasadit přímo na tubus mikroskopu. Charakteristické jsou dva absorpční pruhy - jeden sil­nější mezi čarami D a E, další slabší přesahující čáru E.

  • Hematoporfyrinová zkouška - vychází z reakce hematoporfyrinu s koncentrovanou kyselinou sírovou, která se projeví živě červenou fluorescencí v UV světle po nanesení kapky kyseliny sírové na zkoumaný vzorek. Metoda je velice citlivá, daří se často i u krevních skvrn naru­šených praním, hnilobou a některými chemickými látkami. Nevýhodou metody je znehodnocení použitého vzorku pro jakékoliv další vyšetření.

  • Malachitová zeleň - spolehlivé barvivo rozpustné ve vodě, které prokazuje přítomnost krve. Je vysoce citlivé.

  • HexagonOBTI - je určen nejen na stanovení přítomnosti krve, ale také na prokázání jejího lidského původu. Test je založen na imunochemické detekci he­moglobinu reakcí s monoklonální protilátkou proti lidskému hemoglobinu. Test má vysokou citlivost i při vysokém nařední krve.

  • Imunochromatografický test RSID (Rapid Stain Identification) - je založen na reakci dvou monoklonálních protilátek proti lidskému glykoforinu A, což je protein obsažený v membránách červených krvinek, který zabraňuje jejich shlukování. Test nevykazuje křížovou reakci s jinými lidskými tělními tekutinami (např. slinami, spermatem, močí, mlékem) nebo s krví zvířat (včetně primátů).