Teorie

Osvětlení

Osvětlení v procházejícím světle ve světlém poli

Světlo prochází vzorkem a vstupuje do objektivu, obraz vzniká na základě změn v pohltivosti vzorku.

Osvětlení v dopadajícím světle ve světlém poli

Světlo dopadá shora na neprůhledný vzorek, obraz vzniká na základě změn v odrazivosti.

Osvětlení v procházejícím světle v temném poli

Paprsky procházejí vzorkem šikmo tak, že bez vzorku by nevstupovaly do objektivu. Obraz vytvoří jen paprsky vychýlené lomem, obraz zvýrazňuje změny v optických vlastnostech.

Osvětlení v dopadajícím světle v temném poli

Paprsky dopadají šikmo na vzorek tak, že při dokonale rovném povrchu kolmém k optické ose mikroskopu nevstupují do objektivu. Obraz vytvoří paprsky odražené od nerovností, zvýrazní se reliéf.

Osvětlovací systémy

Ideální osvětlovací systém má stejnou aperturu jako objektiv - využije se maximálně jeho rozlišení a celé pozorovací pole osvětlí rovnoměrně.

Kritické uspořádání osvětlení

Obraz zdroje světla se zobrazí do roviny vzorku. Jde-li o vlákno žárovky, bude osvětělení nerovnoměrné.

Kohlerovo uspořádání

Splňuje požadavky na ideální osvětlovací systém. Kolektor (spojka) vytvoří zvětšený skutečný obraz vlákna žárovky do předmětové roviny kondenzoru (spojka). Kondenzor osvětlí pozorovací pole tak, že každý bod je osvětlem všemi body vlákna žárovky. Irisová clona za kolektorem určuje průměr osvětleného pole (polní clona), irisová clona v předmětovém ohnisku kondenzoru určuje aperturu kondenzoru (aperturní clona).

Ukázka postupu při nastavení Koehlerova uspořádání osvětlovací soustavy:

1. Při stažené cloně zdroje se zaostří vlákno žárovky do přední ohniskové roviny kondenzoru, který je v nejvyšší poloze. Zaostření dosáhneme buď pohybem držáku žárovky (u zdrojů, které jsou součástí stojanu mikroskopu) nebo korektorovou čočkou osvětlovací lampy. Kontrolu zaostření provedeme tak, že na irisové cloně kondenzoru přidržíme bílý papír.

2. Mikroskop zaostříme na kontrastní preparát(clona zdroje je stále uzavřená, clona kondenzoru je otevřená) a světlý kruh v zorném poli, který je obrazem clony zdroje, zaostříme pohybem kondenzoru směrem dolů. Ostrý obraz přesně vycentrujeme pomocí stavěcích šroubů na kondenzoru nebo pohybem zrcátka(při použití osvětlovací lampy používáme vždy plochá zrcátka).

3. Vyjmeme okulár a v objektivu zkontrolujeme, zda obraz vlákna žárovky je zobrazen ostře.

4. Nasadíme okulár a otevíráme clonu zdroje takže její obraz je totožný se zorným polem.

5. Uzavřeme clonu kondenzoru, vyjmeme okulár a otevíráme kondenzorovou clonu, až se okraj jejího obrazu kryje se zadní čočkou objektivu. Tím je dosaženo stejné apertury objektivu i osvětlovacího zařízení(proto se kondenzorové cloně říká též clona aparaturní). Nakonec dáme mezi žárovku a kondenzor matný filtr.